目的 探讨3T3-L1脂肪细胞水通道蛋白7(AQP7)的表达对胰岛素信号通路的影响,寻求改善胰岛素抵抗的新途径.方法 体外培养3T3-L1脂肪细胞,以油红O染色鉴定分化成熟的脂肪细胞.以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理脂肪细胞,检测葡萄糖代谢能力以及培养基中甘油浓度的变化;同时分别用荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)分析AQP7的表达水平.以腺病毒为载体高表达AQP7,检测胰岛素信号通路上胰岛素受体底物1(IRS-1)、蛋白激酶B(PKB)及其磷酸化蛋白水平的改变,从而阐明AQP7表达与胰岛素抵抗的关系.用SPSS 17.0软件进行统计学分析,两组计量资料的比较用独立样本t检验,多组计量资料的比较用单因素方差分析.结果 TNF-α作用分化成熟的脂肪细胞24h构建胰岛素抵抗模型,与空白对照组比较,葡萄糖代谢水平下降50％,甘油浓度减少35％,而AQP7 mRNA及蛋白水平分别下调了75％和28％,差异均有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05).在胰岛素抵抗状态下,胰岛素刺激下的PKB磷酸化蛋白(p-PKB)、IRS-1酪氨酸632磷酸化蛋白(p-tyr632)及IRS-1总蛋白表达受到抑制,而IRS-1丝氨酸307磷酸化蛋白(p-ser307)异常升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).以腺病毒为载体转染脂肪细胞高表达AQP7,随着AQP7表达上调,可逆转TNF-α的
作者：潘伟；沈飞霞；谷雪梅
来源：中国慢性病预防与控制 2017 年 25卷 9期
