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目的: 克隆小鼠白细胞介素-18(IL-18)编码区的cDNA, 并实现在真核细胞中的表达.方法:用小鼠白细胞介素-18( mIL-18)的cDNA核苷酸序列,设计、合成基因序列特异性引物,应用逆转录多聚酶链反应RT -PCR,以植物血凝(PHA)和细菌脂多糖(LPS)刺激的小鼠非粘附性脾细胞的mRNA为模板,扩增获得全长mIL-1 8,转染小鼠成纤维细胞系SVT2,并进行IL-18生物学活性的检测.结果:经测序证实获得的小鼠IL-18的cDNA序列与文献报道的mIL-18的cDNA序列完全一致.构建的小鼠IL-18的重组表达载体在转染小鼠成纤维细胞SVT2后,获得具有生物学活性mIL-18的分泌表达.结论:克隆了小鼠IL-18的cDNA,并实现了在真核细胞中的表达.

作者:成军;柯亨宁;刘妍;斯崇文;王勤环;洪卫国;钟彦伟

来源:中国免疫学杂志 2000 年 16卷 5期

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作者:
成军;柯亨宁;刘妍;斯崇文;王勤环;洪卫国;钟彦伟
来源:
中国免疫学杂志 2000 年 16卷 5期
标签:
白细胞介素-18 逆转录多聚酶链反应 cDNA 基因克隆化 基因表达
目的: 克隆小鼠白细胞介素-18(IL-18)编码区的cDNA, 并实现在真核细胞中的表达.方法:用小鼠白细胞介素-18( mIL-18)的cDNA核苷酸序列,设计、合成基因序列特异性引物,应用逆转录多聚酶链反应RT -PCR,以植物血凝(PHA)和细菌脂多糖(LPS)刺激的小鼠非粘附性脾细胞的mRNA为模板,扩增获得全长mIL-1 8,转染小鼠成纤维细胞系SVT2,并进行IL-18生物学活性的检测.结果:经测序证实获得的小鼠IL-18的cDNA序列与文献报道的mIL-18的cDNA序列完全一致.构建的小鼠IL-18的重组表达载体在转染小鼠成纤维细胞SVT2后,获得具有生物学活性mIL-18的分泌表达.结论:克隆了小鼠IL-18的cDNA,并实现了在真核细胞中的表达.