目的:细胞表面表位包埋法(SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径.由于P185neu/c-erbB-2是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床.方法:采用细胞表面表位包埋法免疫BALB/C小鼠,常规杂交瘤技术进行细胞融合,ELISA法测定,有限稀释法克隆化.结果:筛选得到3株能稳定分泌抗人癌基因erbB-2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞.经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合.免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应.结论:SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景.
作者:王琛;李昀;李平;刘兢;杨正洪;吕源冈;朱德厚;张荣兴;姚阳;吴强;管伟宁;杨枫
来源:中国免疫学杂志 2000 年 16卷 10期