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目的:获得pS2融合蛋白.方法:RT-PCR法从乳腺癌组织中扩增pS2片段,定向克隆到PMS-31b载体上,重组质粒PMS-pS2转化温度敏感型细菌POP2136,使之高效表达融合蛋白MS2-pS2.结果:免疫组织化学试验(IHC)结果表明:纯化的融合蛋白MS2-pS2能与抗pS2进口单抗特异反应.酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blotting试验表明:MS2 -p S2能与pS2 C端31个氨基酸合成肽抗血清特异反应.以此融合蛋白为免疫原得到的抗血清可用于免疫组织化学分析.结论:pS2融合蛋白表达是正确的,亦为进一步研究pS2生物学功能及制备抗pS2单抗奠定了基础.

作者:刘彩云;杨蔚;孙素莲;丁桂风

来源:中国免疫学杂志 2000 年 16卷 11期

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作者:
刘彩云;杨蔚;孙素莲;丁桂风
来源:
中国免疫学杂志 2000 年 16卷 11期
标签:
pS2融合蛋白 原核表达 温度诱导 免疫组织化学
目的:获得pS2融合蛋白.方法:RT-PCR法从乳腺癌组织中扩增pS2片段,定向克隆到PMS-31b载体上,重组质粒PMS-pS2转化温度敏感型细菌POP2136,使之高效表达融合蛋白MS2-pS2.结果:免疫组织化学试验(IHC)结果表明:纯化的融合蛋白MS2-pS2能与抗pS2进口单抗特异反应.酶联免疫吸附试验(ELISA)及Western blotting试验表明:MS2 -p S2能与pS2 C端31个氨基酸合成肽抗血清特异反应.以此融合蛋白为免疫原得到的抗血清可用于免疫组织化学分析.结论:pS2融合蛋白表达是正确的,亦为进一步研究pS2生物学功能及制备抗pS2单抗奠定了基础.