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目的:构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白,并初步观察其免疫诊断价值.方法:将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体,转化重组体到大肠杆菌E.coli 2566进行表达;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白;用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达纯化产物;用Dot-ELISA分别检测了血吸虫病人及正常人的血清.结果:重组的日本血吸虫铁蛋白以GMC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)-日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达,分子量为40 kD,能被日本血吸虫感染兔血清识别.用重组铁蛋白检测30例日本血吸虫病人血清和30例正常人血清,阳性率和假阳性率分别为93.3

作者:王敏;易新元;曾宪芳;袁仕善;李先平

来源:中国免疫学杂志 2004 年 20卷 10期

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作者:
王敏;易新元;曾宪芳;袁仕善;李先平
来源:
中国免疫学杂志 2004 年 20卷 10期
标签:
日本血吸虫 铁蛋白 基因克隆 表达 免疫诊断
目的:构建、表达、纯化日本血吸虫铁蛋白基因的原核表达重组蛋白,并初步观察其免疫诊断价值.方法:将日本血吸虫铁蛋白基因亚克隆于pGMC载体,转化重组体到大肠杆菌E.coli 2566进行表达;采用电泳层析法分离纯化日本血吸虫铁蛋白;用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达纯化产物;用Dot-ELISA分别检测了血吸虫病人及正常人的血清.结果:重组的日本血吸虫铁蛋白以GMC(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子)-日本血吸虫铁蛋白融合蛋白的形式在细菌中得到高效表达,分子量为40 kD,能被日本血吸虫感染兔血清识别.用重组铁蛋白检测30例日本血吸虫病人血清和30例正常人血清,阳性率和假阳性率分别为93.3