目的:构建嵌合型抗人黑色素瘤抗体的真核表达载体,并实现真核表达.方法:从3株杂交瘤细胞中克隆得到鼠源单抗的可变区基因,插入含有抗人Tac抗原信号肽以及人免疫球蛋白κ轻链恒定区基因和γ1重链恒定区基因的真核表达载体pMH-CA中,转染293T细胞,进行嵌合抗体表达,并用RT-PCR、ELISA、Western blot免疫印迹等对抗体表达鉴定.结果:成功构建了抗人黑色素瘤人-鼠嵌合抗体,并实现其真核表达.RT-PCR证实了该抗体在mRNA水平上的表达,ELISA和Western blot证实了抗人黑色素瘤人-鼠嵌合抗体的表达.结论:成功表达了抗人黑色素瘤人-鼠嵌合抗体.
作者：冯蕾；韩骅
来源：中国免疫学杂志 2005 年 21卷 4期
