目的:对乙型肝炎病毒重组多表位抗原基因在大肠杆菌中表达的融合蛋白P/BPT进行免疫原性分析,以期为HBV预防/治疗性疫苗的研制奠定实验基础.方法:构建重组质粒pWR450-1/BPT,在大肠杆菌中诱导表达并纯化蛋白P/BPT,免疫BALB/c小鼠,乳酸脱氢酶释放法检测该融合蛋白诱导小鼠的细胞毒T淋巴细胞(CTL)应答,ELISA法检测小鼠血清抗-P/BPT抗体水平,流式细胞仪检测小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群比例,用RT-PCR方法半定量检测细胞因子特异性mRNA,MIT法测淋巴细胞增殖效应.结果:P/BPT蛋白免疫后,效靶比为100:1时,可有效诱发特异性CTL应答(P＜0.05);ELISA方法测出小鼠血清抗-P/BPTIgG明显升高(P＜0.05);P/BPT蛋白免疫后,可显著刺激小鼠脾淋巴细胞增值(P＜0.05);CD4+T淋巴细胞和细胞因子IFN-γ的增殖和分泌水平亦有明显升高.结论:该融合蛋白可有效诱导小鼠体液免疫和细胞免疫应答,为进一步研制乙肝预防治疗性疫苗奠定了初步基础.
作者：骆利敏；李明；夏虎；董文其；黄建生；陈百虹
来源：中国免疫学杂志 2005 年 21卷 6期
