目的:构建针对钙转运蛋白(CaT1)特异性干扰RNA(siRNA)及其表达载体,并检测其对CaT1基因的干扰作用.方法:设计CaT1靶向的发夹状siRNA,合成两条互补的寡核苷酸链,退火后连接入pSilencer3.1-H1载体,转化扩增后进行序列测定.用脂质体转染法转染人类胃癌细胞BGC,通过RT-PCR检测CaT1基因表达水平的变化.结果:酶切鉴定与DNA测序分析证明CaT1基因的siRNA载体构建正确,RT-PCR结果表明CaT1基因的表达水平明显降低.结论:成功地构建了针对CaT1基因的siRNA载体,转染细胞后可抑制CaT1基因表达.
作者：杨新宇；张雷；郑花；康劲松；李洪岩；房学东
来源：中国免疫学杂志 2008 年 24卷 3期
