目的:制备抗人IL-31单克隆抗体,建立ELISA检测体系.方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗IL-31单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体的亚类、滴度和特异性;采用ELISA技术制备IL-31检测试剂盒,并对自制试剂盒进行评价.结果:获得了两株稳定产生抗IL-31单克隆抗体的杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG3,抗体特异性好,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价达106.试剂盒检测灵敏度为5.726 pg/ml,检测IL-1、IL-6、TNF-α、RF的P/N值均小于2.1,为阴性,靶抗原IL-31的检测结果为阳性(P/N值=13.76);自制试剂盒检测特应性皮炎血清IL-31水平为(532.83±90.39) pg/ml,对照组血清IL-31水平为(103.31±19.17) pg/ml,皮炎组明显高于对照组,有显著性差异(P ＜0.001).结论:成功制备了抗IL-31单克隆抗体,建立的ELISA试剂盒可用于临床检测IL-31.
作者：董革辉；魏培；黄俊琼；杜青波；岳欢；杜文胜；谭艳芳；孙万邦
来源：中国免疫学杂志 2014 年 30卷 4期
