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目的:为了探讨雷帕霉素对RAW264.7细胞miR-30b、miR-200a和miR-17-5p等10种与细胞自噬相关的miRNAs表达水平的影响,为进一步研究miRNAs调控细胞自噬的机制提供理论依据。方法:雷帕霉素刺激RAW264.7巨噬细胞后,分别在2、4、6、8 h提取细胞small RNA,利用miRNA特异性的茎环引物反转录成cDNA,采用Real-Time PCR检测miR-30b、miR-30c、miR-106a、miR-214、miR-183、miR-200a、miR-376c、miR-17-5p、miR-142-3p、miR-377分子的表达情况。结果:雷帕霉素作用RAW264.7细胞后,miR-17-5p、miR-106在2、4、6 h表达上调(大于2.1倍P<0.05),miR-214在2、8小时表达上调(>2.4倍,P<0.05),miR-30b、miR-30c、miR-183、miR-200a、miR-376c、miR-142-3p在2、6、8 h表达上调(>2.4倍,P<0.05),而miR-183、miR-200a在4 h表达下调(>2.1倍,P<0.05),miR-30b在8小时则是显著性表达下调(大于50倍,P<0.05),miR-377在4 h则是表达上调(>2.5倍,P<0.05),但在2、8 h则是显著表达下调(>50倍,P<0.05)。结论:雷帕霉素刺激RAW264.7巨噬细胞后miR-200a、miR-30b、miR-377、miR-30c、miR-376c、miR-17-5p有显著性变化,说明这些miRNAs可能通过调控某些自噬相关基因在细胞自噬过程中发挥着重要作用

作者:张涛;郑锡铭;周林林;刘鑫;赵瑾;徐广贤

来源:中国免疫学杂志 2014 年 8期

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作者:
张涛;郑锡铭;周林林;刘鑫;赵瑾;徐广贤
来源:
中国免疫学杂志 2014 年 8期
标签:
miRNA 雷帕霉素 real-time PCR miRNA Rapamycin real-time PCR
目的:为了探讨雷帕霉素对RAW264.7细胞miR-30b、miR-200a和miR-17-5p等10种与细胞自噬相关的miRNAs表达水平的影响,为进一步研究miRNAs调控细胞自噬的机制提供理论依据。方法:雷帕霉素刺激RAW264.7巨噬细胞后,分别在2、4、6、8 h提取细胞small RNA,利用miRNA特异性的茎环引物反转录成cDNA,采用Real-Time PCR检测miR-30b、miR-30c、miR-106a、miR-214、miR-183、miR-200a、miR-376c、miR-17-5p、miR-142-3p、miR-377分子的表达情况。结果:雷帕霉素作用RAW264.7细胞后,miR-17-5p、miR-106在2、4、6 h表达上调(大于2.1倍P<0.05),miR-214在2、8小时表达上调(>2.4倍,P<0.05),miR-30b、miR-30c、miR-183、miR-200a、miR-376c、miR-142-3p在2、6、8 h表达上调(>2.4倍,P<0.05),而miR-183、miR-200a在4 h表达下调(>2.1倍,P<0.05),miR-30b在8小时则是显著性表达下调(大于50倍,P<0.05),miR-377在4 h则是表达上调(>2.5倍,P<0.05),但在2、8 h则是显著表达下调(>50倍,P<0.05)。结论:雷帕霉素刺激RAW264.7巨噬细胞后miR-200a、miR-30b、miR-377、miR-30c、miR-376c、miR-17-5p有显著性变化,说明这些miRNAs可能通过调控某些自噬相关基因在细胞自噬过程中发挥着重要作用