目的:本研究通过诱导结核杆菌在低氧环境中进入持留状态,比较分析不同时间点、不同环境下结核杆菌Pup、Dop、PafA和Mpa 基因的表达水平差异,探讨研究Pup-蛋白酶体系统对结核杆菌持留性的调控作用。方法:本实验以结核杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株(以下简称为H37Rv菌株)为研究对象,在低氧、有氧环境下进行培养,分别提取不同时间点每组样本菌株的总RNA,并进行纯度鉴定。运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法,分别检测各组结核杆菌菌株的Pup、Dop、PafA和Mpa 基因的表达;比较分析不同时间点、不同环境下的各结核杆菌菌株Pup、Dop、PafA和Mpa基因的表达水平差异。结果:在不同时间点对低氧环境下菌株Pup、Dop、PafA和Mpa的表达水平进行检测,Pup、Dop、PafA和Mpa基因的相对表达水平:低氧环境下,与0 d比较,Pup基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.66、2.43、2.76倍,Dop基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.38、1.91、2.54、3.28倍,PafA基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.22、1.75、2.37、2.67倍,Mpa 基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.66、2.21、2.63倍( P<0.05);以有氧环境组做对照,低氧环境下,相同时间点,Pup 基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.85、2.81、2.93倍,Dop基
作者:朱彬;雷英;吴芳;张辉;张春军;章乐;吴江东;曹旭东;邬博;何丽;张玉清;李瑞山;王钊;张万江
来源:中国免疫学杂志 2015 年 4期