目的：原核表达沙眼衣原体（ Ct）质粒分泌性蛋白pgp3，制备其单克隆抗体（ mAbs）并鉴定其基本生物学特征。方法：构建pGEX-6p2-pgp3原核表达载体，在大肠杆菌中表达GST-pgp3融合蛋白作为抗原免疫BALB／c小鼠，取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2／0融合，ELISA法筛选分泌抗pgp3蛋白mAbs的细胞株，对mAbs特异性、型别、类及亚类和效价进行鉴定。结果：GST-pgp3融合蛋白表达成功，且成功筛选出5株稳定分泌mAbs的杂交瘤细胞株，其中4株为分泌抗pgp3 mAbs的杂交瘤细胞株（P1B3、P2A1、P2B6、P2C2），mAbs类型为IgG1／κ型，剩余1株为分泌抗GST 蛋白的杂交瘤细胞株（P3B4），mAbs类型为IgG2b／κ型。交瘤细胞株P1B3、P2A1、P2B6、P2C2、P3B4培养上清中的mAbs效价分别为1∶6400、1∶3200、1∶12800、1∶6400和1∶6400。结论：成功制备出抗pgp3 mAbs，为进一步研究Ct质粒蛋白pgp3功能及为Ct检测方法的建立奠定了基础。
作者：贾晓晖；周芳；赵霞；李婷；贾天军
来源：中国免疫学杂志 2015 年 5期
