目的：：在细胞水平上分析高表达OAZI-1的小鼠B16-F1细胞能否活化抗原提呈细胞,促进抗原提呈细胞对肿瘤的吞噬以及抗原递呈作用。方法：转染重组质粒后,用RT-PCR和Western blot技术筛选获得高表达OAZI-1的小鼠黑色素瘤B16-F1肿瘤细胞(B16/OAZI-1),同时构建转染空载体质粒pCDNA3．1(+)的小鼠黑色素瘤B16-F1肿瘤细胞(B16/3．1)用作实验对照。制备BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞、脾淋巴细胞和骨髓来源的树突状细胞( DC),将B16/OAZI-1和B16/3．1分别与小鼠腹腔巨噬细胞和DC按照1∶5和1∶1的细胞个数比例混合培养4 h,流式细胞术检测巨噬细胞和DC对肿瘤细胞的吞噬率。将B16/OAZI-1和B16/3．1分别与小鼠DC按照1∶5的细胞个数比例混合培养24 h后,流式细胞术检测DC表面分子CD40、CD80和CD86表达的变化。将经肿瘤细胞活化的DC与小鼠脾淋巴细胞混合培养24 h后,ELISA检测细胞上清中IFN-γ的含量。结果：巨噬细胞和DC对B16/OAZI-1细胞吞噬率分别为24．7
作者：杨建林；李倩；韩钰；何玲；吴红艳；曹春雨；王艳林
来源：中国免疫学杂志 2015 年 6期
