目的::对结核分枝杆菌Rv2460c基因(编码ClpP2蛋白)进行克隆,表达,并评价其编码产物的免疫原性。方法:扩增结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)H37Rv 的Rv2460c基因,构建重组质粒pET32a(+)-ClpP2,用IPTG诱导表达,利用亲和层析法进行纯化。用SDS-PAGE和Western blot分析重组蛋白ClpP2的表达和鉴定。用生物信息学对Mtb ClpP2的免疫原性分析和表位预测。酶联免疫吸附法( ELISA)测定兔和TB病人血清anti-ClpP2滴度。结果:重组ClpP2蛋白酶在大肠杆菌中以包涵体形式表达,经 bandscan 软件分析纯化蛋白的纯度为93
作者:康月茜;张春燕;穆柳青;卢楠;杨春;李岱容
来源:中国免疫学杂志 2015 年 6期