目的：研究不同培养环境对调节性T细胞( regulatory T cells，Treg）和Th17细胞分化的影响，探索能够逆转肿瘤微环境诱导的免疫耐受的手段。方法：克隆人白介素-6( IL-6）的基因，将其转入表达TGF-β的肿瘤细胞株中，并筛选稳转系；分别收集含或不含IL-6的肿瘤细胞培养上清，制备成条件培养基(Conditioned medium，CM），用于体外培养人外周血单核细胞( Peripheral blood mononuclear cells，PBMC），流式检测PBMC在不同培养环境中Treg和Th17细胞的变化情况。结果：RT-PCR分析表明BEL-7402表达TGF-β的水平明显高于HepG2，因此选择BEL -7402用于制备IL-6的稳转系；ELISA检测结果表明所制备的稳转系能够有效地表达IL-6；流式结果表明，由肿瘤细胞培养上清制备的CM能明显诱导T细胞分化为Treg，而在IL-6存在的情况下则能明显抑制Treg细胞的形成，并促进T细胞分化为Th17细胞。结论：肿瘤细胞培养上清促使PBMC中Treg比例增加；而在其中添加IL-6则能够降低Treg细胞比例，并增加Th17细胞的比例。
作者：邵红伟；杨海林；梁春梅；陆晓敏；刘婷；沈晗；吴凤麟；黄树林
来源：中国免疫学杂志 2015 年 7期
