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目的:探讨MicroRNA-34a(miR-34a)对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及其可能的分子机制。方法:体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞系,利用miR-34a重组质粒及Scrambled miRNA重组质粒分别构建miR-34a及阴性对照miRNA稳定转染细胞株,qRT-PCR检测细胞内miR-34a表达。选取6周龄雄性BLAB/c裸鼠15只,随机分为3组:miR-34a组(5只),Scrambled miRNA组(5只)及空白对照组(5只)。于裸鼠背部近右后肢皮下注射重组CNE-2细胞悬液,建立移植瘤模型,每7 d测定实验组与对照组肿瘤体积变化,饲养35 d后处死,完整取出肿瘤,测定肿瘤重量及终体积。提取肿瘤组织RNA及蛋白,采用qRT-PCR检测肿瘤组织中miR-34a的表达;分别采用qRT-PCR及免疫组化法检测细胞周期调控基因CDK6及抗凋亡基因Bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结果:miR-34a稳定转染CNE-2细胞后可显著提高细胞内miR-34a表达量( P<0.05)。15只裸鼠均成功构建皮下移植瘤模型,饲养21 d后,与Scrambled miRNA组及空白对照组相比,miR-34a组肿瘤体积显著减小(P<0.05)。饲养35 d后,miR-34a组、Scrambled miRNA组及空白对照组肿瘤平均重量分别为(0.81±0.13)g、(1.47±0.21)g、(1.58±0.37)g,肿瘤平均终体积分别为(351.37±98.19)mm3、(798.75±91.04)mm3、(849

作者:张浩轩;贾音

来源:中国免疫学杂志 2015 年 7期

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作者:
张浩轩;贾音
来源:
中国免疫学杂志 2015 年 7期
标签:
miR-34a 鼻咽癌 CNE-2细胞 裸鼠 皮下移植瘤 抑制作用 分子机制 MicroRNA-34a Human nasopharyngeal carcinoma CNE-2 cell line Nude mice Subcutaneous xenograft tumor Inhibitory effect Molecular mechanisms
目的:探讨MicroRNA-34a(miR-34a)对鼻咽癌裸鼠皮下移植瘤的生长抑制作用及其可能的分子机制。方法:体外培养人鼻咽癌CNE-2细胞系,利用miR-34a重组质粒及Scrambled miRNA重组质粒分别构建miR-34a及阴性对照miRNA稳定转染细胞株,qRT-PCR检测细胞内miR-34a表达。选取6周龄雄性BLAB/c裸鼠15只,随机分为3组:miR-34a组(5只),Scrambled miRNA组(5只)及空白对照组(5只)。于裸鼠背部近右后肢皮下注射重组CNE-2细胞悬液,建立移植瘤模型,每7 d测定实验组与对照组肿瘤体积变化,饲养35 d后处死,完整取出肿瘤,测定肿瘤重量及终体积。提取肿瘤组织RNA及蛋白,采用qRT-PCR检测肿瘤组织中miR-34a的表达;分别采用qRT-PCR及免疫组化法检测细胞周期调控基因CDK6及抗凋亡基因Bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结果:miR-34a稳定转染CNE-2细胞后可显著提高细胞内miR-34a表达量( P<0.05)。15只裸鼠均成功构建皮下移植瘤模型,饲养21 d后,与Scrambled miRNA组及空白对照组相比,miR-34a组肿瘤体积显著减小(P<0.05)。饲养35 d后,miR-34a组、Scrambled miRNA组及空白对照组肿瘤平均重量分别为(0.81±0.13)g、(1.47±0.21)g、(1.58±0.37)g,肿瘤平均终体积分别为(351.37±98.19)mm3、(798.75±91.04)mm3、(849