目的：构建、表达ZZ亲和肽与碱性磷酸酶（ AP）融合蛋白，并研究其生物学活性。方法：将ZZ亲和肽基因与AP基因重组，构建原核表达载体pEZZ-AP并利用大肠杆菌表达，金属离子亲和层析纯化目的蛋白，Western blot鉴定ZZ-AP生物学活性并初步应用于免疫细胞化学。结果：所构建重组质粒pEZZ-AP 经E.coli DH5α表达，SDS-PAGE结果显示目的蛋白相对分子量为62 kD，与理论值相近。 Western blot结果表明ZZ-AP融合蛋白既具有兔IgG抗体结合活性，又具有碱性磷酸酶活性，在细胞免疫组化应用中与AP标记的羊抗兔二抗显色模式与效果相似。结论：ZZ-AP融合蛋白构建成功，该融合蛋白具有兔IgG 抗体结合活性和碱性磷酸酶活性，细胞免疫组化应用结果表明该融合蛋白在免疫分析中具有潜在的应用价值。
作者：鲍如梦；赵爽佳；薛敏；杨洪鸣；唐金宝
来源：中国免疫学杂志 2015 年 9期
