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目的::探讨脐带间充质干细胞运载scFvCD20:sTRAIL融合蛋白的新型双重靶向系统对CD20+ BJAB细胞的生长抑制作用。方法:采用传统分子生物学技术构建 pLenR. scFvCD20:sTRAIL、pLenR. ISZ-sTRAIL、pLenR. scFvCD20及pLenR. copGFP四种慢病毒表达载体,利用四质粒慢病毒包装系统于293T细胞中包装慢病毒颗粒,并感染人脐带组织来源的MSCs( HUMSCs),使其稳定表达融合蛋白。于体外采用CCK8细胞增殖抑制实验检测scFvCD20:sTRAIL融合蛋白对CD20阳性BJAB细胞和Raji细胞、CD20阴性Jurkat细胞以及正常人外周血单个核细胞( PBMCs)的生长抑制作用。建立NOD/SCID鼠BJAB细胞皮下移植瘤模型,将MSC. scFvCD20:sTRAIL经尾静脉注射入小鼠体内,每3 d测量瘤体积,根据肿瘤体积计算抑瘤率。结果:成功构建了慢病毒表达载体pLenR. scFvCD20:sTRAIL、 pLenR. ISZ-sTRAIL、pLenR. scFvCD20及pLenR. copGFP,且经慢病毒感染可在HUMSCs中稳定表达。体外实验显示,scFvCD20:sTRAIL融合蛋白可不同程度地提高对CD20阳性BJAB和Raji细胞的生长抑制作用,而对CD20阴性Jurkat细胞的生长抑制作用降低;而且不影响PBMCs的生长。体内实验表明, MSC. scFvCD20:sTRAIL可显著抑制BJAB淋巴瘤的生长,初始治疗后第24天,抑瘤率达65.2

作者:范冬梅;张晓龙;张晴;卢杨;杨圆圆;袁向飞;张砚君;熊冬生

来源:中国免疫学杂志 2016 年 32卷 7期

知识库介绍

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作者:
范冬梅;张晓龙;张晴;卢杨;杨圆圆;袁向飞;张砚君;熊冬生
来源:
中国免疫学杂志 2016 年 32卷 7期
标签:
间充质干细胞 CD20 TRAIL 非霍奇金氏淋巴瘤 肿瘤免疫 Mesenchymal stem cell CD20 TRAIL Non-Hodgkin’ s lymphoma Tumor immunity
目的::探讨脐带间充质干细胞运载scFvCD20:sTRAIL融合蛋白的新型双重靶向系统对CD20+ BJAB细胞的生长抑制作用。方法:采用传统分子生物学技术构建 pLenR. scFvCD20:sTRAIL、pLenR. ISZ-sTRAIL、pLenR. scFvCD20及pLenR. copGFP四种慢病毒表达载体,利用四质粒慢病毒包装系统于293T细胞中包装慢病毒颗粒,并感染人脐带组织来源的MSCs( HUMSCs),使其稳定表达融合蛋白。于体外采用CCK8细胞增殖抑制实验检测scFvCD20:sTRAIL融合蛋白对CD20阳性BJAB细胞和Raji细胞、CD20阴性Jurkat细胞以及正常人外周血单个核细胞( PBMCs)的生长抑制作用。建立NOD/SCID鼠BJAB细胞皮下移植瘤模型,将MSC. scFvCD20:sTRAIL经尾静脉注射入小鼠体内,每3 d测量瘤体积,根据肿瘤体积计算抑瘤率。结果:成功构建了慢病毒表达载体pLenR. scFvCD20:sTRAIL、 pLenR. ISZ-sTRAIL、pLenR. scFvCD20及pLenR. copGFP,且经慢病毒感染可在HUMSCs中稳定表达。体外实验显示,scFvCD20:sTRAIL融合蛋白可不同程度地提高对CD20阳性BJAB和Raji细胞的生长抑制作用,而对CD20阴性Jurkat细胞的生长抑制作用降低;而且不影响PBMCs的生长。体内实验表明, MSC. scFvCD20:sTRAIL可显著抑制BJAB淋巴瘤的生长,初始治疗后第24天,抑瘤率达65.2