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目的:探讨STIM1对乳腺癌细胞存活与增殖的影响及初步机制分析.方法:以正常乳腺上皮细胞MCF-10A作为对照,Western blot检测乳腺癌 MCF7、HCC1569、MDA-MB-231、BT549细胞中STIM1的蛋白表达;将STIM1的靶向siRNA序列(STIM1-siRNA组)转染MDA-MB-231细胞,并设置阴性对照组和空白对照组,转染48 h后检测各组细胞STIM1的蛋白表达;MTT法检测转染24、48和72 h的细胞活力;流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率;RT-PCR检测IL-6和 TNF-α 的mRNA表达;Western blot检测增殖相关蛋白细胞增殖核抗原(PCNA)、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)及STAT3和磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)的蛋白表达.结果:乳腺癌细胞中STIM1的蛋白表达均显著高于在MCF-10A细胞表达(P<0.05);转染STIM1的siRNA后MDA-MB-231细胞中STIM1的蛋白表达显著低于空白对照组(P<0.05);与空白对照组比较,STIM1-siRNA组细胞在48 h和72 h的细胞活力显著降低,在48 h的细胞凋亡率显著升高,IL-6和TNF-α的mRNA表达显著降低,PCNA、Bcl-2和p-STAT3的蛋白表达显著降低,Bax和Caspase3蛋白表达显著升高.结论:STIM1基因在乳腺癌细胞高表达,通过RNA干扰抑制其表达可降低癌细胞活力,诱导细胞凋

作者:邓程伟;吴进盛;何淑波;罗超

来源:中国免疫学杂志 2018 年 34卷 5期

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作者:
邓程伟;吴进盛;何淑波;罗超
来源:
中国免疫学杂志 2018 年 34卷 5期
标签:
STIM1基因 乳腺癌 增殖 凋亡 STAT3信号 免疫因子 STIM1 gene Breast cancer Proliferation Apoptosis STAT3 signal Immune factor
目的:探讨STIM1对乳腺癌细胞存活与增殖的影响及初步机制分析.方法:以正常乳腺上皮细胞MCF-10A作为对照,Western blot检测乳腺癌 MCF7、HCC1569、MDA-MB-231、BT549细胞中STIM1的蛋白表达;将STIM1的靶向siRNA序列(STIM1-siRNA组)转染MDA-MB-231细胞,并设置阴性对照组和空白对照组,转染48 h后检测各组细胞STIM1的蛋白表达;MTT法检测转染24、48和72 h的细胞活力;流式细胞术检测转染48 h的细胞凋亡率;RT-PCR检测IL-6和 TNF-α 的mRNA表达;Western blot检测增殖相关蛋白细胞增殖核抗原(PCNA)、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)及STAT3和磷酸化的信号转导与转录因子3(p-STAT3)的蛋白表达.结果:乳腺癌细胞中STIM1的蛋白表达均显著高于在MCF-10A细胞表达(P<0.05);转染STIM1的siRNA后MDA-MB-231细胞中STIM1的蛋白表达显著低于空白对照组(P<0.05);与空白对照组比较,STIM1-siRNA组细胞在48 h和72 h的细胞活力显著降低,在48 h的细胞凋亡率显著升高,IL-6和TNF-α的mRNA表达显著降低,PCNA、Bcl-2和p-STAT3的蛋白表达显著降低,Bax和Caspase3蛋白表达显著升高.结论:STIM1基因在乳腺癌细胞高表达,通过RNA干扰抑制其表达可降低癌细胞活力,诱导细胞凋