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目的:探讨甘草查尔酮A(LCA)对人结肠癌细胞增殖与凋亡的影响,并分析相关分子机制.方法:通过体外培养人结肠癌HCT116和SW480细胞,MTT实验检测不同浓度(0、1、2.5、5、10、25、50μmol/L)的LCA对细胞增殖的影响,测定12 h,24 h和48 h的细胞增殖抑制率,并计算两组细胞的IC50.随后选择HCT116细胞为研究对象,并将细胞分为4组:对照组,50μmol/L的LCA组,5 mmol/L的ROS抑制剂(NAC)组以及50μmol/L LCA+5 mmol/L NAC组.流式细胞仪检测各组细胞的ROS水平及凋亡状况;Western blot检测内质网应激(ERS)相关蛋白ATF6、XBP-1、ATF4和CHOP以及凋亡相关蛋白Bcl2、Bax和Cleaved-caspase3的表达.结果:随着LCA作用浓度的增大和时间的延长,人结肠癌HCT116和SW480细胞的增殖抑制率增大,具有显著的浓度和时间依赖性;LCA对HCT116和SW480细胞作用48 h的IC50分别为21.94μmol/L和29.38μmol/L.与对照组比较,NAC能显著降低细胞ROS及凋亡水平(均P<0.01),而LCA能显著促进细胞ROS的释放及凋亡(均P<0.01).与对照组比较,NAC组细胞内质网应激相关蛋白ATF6、XBP-1、ATF4、CHOP和促凋亡蛋白Bax、Cleaved-caspase3的表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl2的表达水平显著增加(P<0.01);而LCA组细胞ATF6、XBP-1、ATF4、CHOP、Bax和Cle

作者:张九成;陈卫东;邹宁

来源:中国免疫学杂志 2019 年 35卷 5期

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作者:
张九成;陈卫东;邹宁
来源:
中国免疫学杂志 2019 年 35卷 5期
标签:
甘草查尔酮A 人结肠癌 细胞增殖 细胞凋亡 氧化应激 Bcl2/Bax/Cleaved-caspase3信号通路
目的:探讨甘草查尔酮A(LCA)对人结肠癌细胞增殖与凋亡的影响,并分析相关分子机制.方法:通过体外培养人结肠癌HCT116和SW480细胞,MTT实验检测不同浓度(0、1、2.5、5、10、25、50μmol/L)的LCA对细胞增殖的影响,测定12 h,24 h和48 h的细胞增殖抑制率,并计算两组细胞的IC50.随后选择HCT116细胞为研究对象,并将细胞分为4组:对照组,50μmol/L的LCA组,5 mmol/L的ROS抑制剂(NAC)组以及50μmol/L LCA+5 mmol/L NAC组.流式细胞仪检测各组细胞的ROS水平及凋亡状况;Western blot检测内质网应激(ERS)相关蛋白ATF6、XBP-1、ATF4和CHOP以及凋亡相关蛋白Bcl2、Bax和Cleaved-caspase3的表达.结果:随着LCA作用浓度的增大和时间的延长,人结肠癌HCT116和SW480细胞的增殖抑制率增大,具有显著的浓度和时间依赖性;LCA对HCT116和SW480细胞作用48 h的IC50分别为21.94μmol/L和29.38μmol/L.与对照组比较,NAC能显著降低细胞ROS及凋亡水平(均P<0.01),而LCA能显著促进细胞ROS的释放及凋亡(均P<0.01).与对照组比较,NAC组细胞内质网应激相关蛋白ATF6、XBP-1、ATF4、CHOP和促凋亡蛋白Bax、Cleaved-caspase3的表达水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),抗凋亡蛋白Bcl2的表达水平显著增加(P<0.01);而LCA组细胞ATF6、XBP-1、ATF4、CHOP、Bax和Cle