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目的:探讨木香烃内酯(Cos)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠原代巨噬细胞炎性小体激活和炎症反应的影响.方法:提取并培养小鼠腹腔原代巨噬细胞,用不同浓度Cos预处理巨噬细胞1 h后,1 mg/L LPS处理,分为空白对照组、模型组(单用LPS)、不同浓度(5、10和20μmol/L)Cos+LPS组;ELISA法检测培养液上清中TNF-α/IL-6的含量,qPCR法检测TNF-α/IL-6 mRNA表达;为明确Cos对LPS诱发的炎症反应的保护机制,增加NLRP3抑制剂MCC950组(10μmol/L),LPS刺激4 h、6 h,Western blot检测NLRP3、ERK及IκB的激活,细胞免疫荧光实验观察NLRP3的蛋白水平.结果:与LPS组比较,LPS+Cos组TNF-α/IL-6的mRNA表达及细胞培养液上清TNF-α/IL-6分泌均显著降低(P<0.05);Western blot和细胞免疫荧光实验结果表明,与LPS组比较,LPS+Cos组的NLRP3蛋白水平显著降低,其抑制效果与NLRP3抑制剂MCC950相当(P<0.05);Western blot结果表明,与LPS组比较,LPS+MCC950组和LPS+Cos组的ERK及IκB的激活均显著降低(P<0.01).结论:Cos能有效抑制LPS诱导的巨噬细胞炎性小体和NF-κB的激活而缓解炎症反应.

作者:吴晓燕;厉星

来源:中国免疫学杂志 2019 年 35卷 12期

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作者:
吴晓燕;厉星
来源:
中国免疫学杂志 2019 年 35卷 12期
标签:
脓毒症 脂多糖(LPS) 木香烃内酯 NLRP3
目的:探讨木香烃内酯(Cos)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠原代巨噬细胞炎性小体激活和炎症反应的影响.方法:提取并培养小鼠腹腔原代巨噬细胞,用不同浓度Cos预处理巨噬细胞1 h后,1 mg/L LPS处理,分为空白对照组、模型组(单用LPS)、不同浓度(5、10和20μmol/L)Cos+LPS组;ELISA法检测培养液上清中TNF-α/IL-6的含量,qPCR法检测TNF-α/IL-6 mRNA表达;为明确Cos对LPS诱发的炎症反应的保护机制,增加NLRP3抑制剂MCC950组(10μmol/L),LPS刺激4 h、6 h,Western blot检测NLRP3、ERK及IκB的激活,细胞免疫荧光实验观察NLRP3的蛋白水平.结果:与LPS组比较,LPS+Cos组TNF-α/IL-6的mRNA表达及细胞培养液上清TNF-α/IL-6分泌均显著降低(P<0.05);Western blot和细胞免疫荧光实验结果表明,与LPS组比较,LPS+Cos组的NLRP3蛋白水平显著降低,其抑制效果与NLRP3抑制剂MCC950相当(P<0.05);Western blot结果表明,与LPS组比较,LPS+MCC950组和LPS+Cos组的ERK及IκB的激活均显著降低(P<0.01).结论:Cos能有效抑制LPS诱导的巨噬细胞炎性小体和NF-κB的激活而缓解炎症反应.