目的:制备和纯化抗钠-钙交换体(Na+-Ca2+exchanger,NCX)α-2(840-877)单克隆抗体,并观察该抗体对大鼠缺血性心律失常的影响.方法:利用化学合成的NCXα-2(840-877)肽段为免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术和间接ELISA法筛选,获得可稳定分泌NCXα-2(840-877)单克隆抗体的杂交瘤细胞株.通过ELISA和SDS-PAGE等方法检测其效价和纯度.结扎冠脉左前降支建立大鼠缺血性心律失常模型.缺血前5 min用3F10(10μg/m1)抗体灌注离体心脏,在体实验经大鼠尾静脉注射3F10(50μg/kg)抗体,观察抗体大鼠室早数目、室速和室颤发生率和持续时间的影响.应用全细胞膜片钳技术观察3F10(10μg/m1)抗体对正常大鼠心肌细胞INa/Ca的影响.结果:①成功制备并获得抗NCXα-2(840-877)单克隆抗体3F10,其效价和浓度分别为1:40960、1.62 mg/m1.②3F10抗体预处理可明显抑制大鼠离体和在体缺血性心律失常的发生.缺血前5 min给予3F10(10μg/m1)抗体预处理后,离体心脏的室速、室颤的发生率分别由100％和77.78％降至25％和25％,其持续时间和室早的个数也明显减少(P<0.05).在麻醉大鼠,当给予3F10(50μg/kg)抗体预处理后,与模型组相比,大鼠室速和室颤的发生率分别由100％和83.33％降至33.33％和33.33％,其持续时间及室早的数目均明显减少(P<0.05).

作者：王苗苗；陈依春；白晓洁；马瑞君；封启龙

来源：中国免疫学杂志 2019 年 35卷 23期