目的:研究miR-199a-5p对幼年类风湿关节炎(JRA)软骨细胞增殖、凋亡的影响和潜在的分子机制.方法:qRT-PCR检测软骨细胞中miR-199a-5p和PDCD5 RNA的表达,Western blot检测PDCD5、增殖相关蛋白CyclinD1、p21和p27以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和cleaved-caspase3的表达,MTT法检测软骨细胞增殖,流式细胞术测定软骨细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证miR-199a-5p和PDCD5的调控关系.结果:与正常软骨细胞相比,在类风湿关节炎(RA)软骨细胞中miR-199a-5p表达量显著降低(P<0.05),而PDCD5 mRNA和蛋白表达量则显著升高(P<0.05);过表达miR-199a-5p和抑制PDCD5表达均可促进RA软骨细胞增殖,抑制RA软骨细胞凋亡;双荧光素酶报告系统结果表明,miR-199a-5p靶向负调控PDCD5的表达;过表达PDCD5逆转了miR-199a-5p过表达对软骨细胞增殖和凋亡的作用.结论:miR-199a-5p通过靶向调控PDCD5表达调控RA软骨细胞增殖和凋亡,miR-199a-5p是RA的潜在分子靶点.
作者:符艺影;许志有;韩萍;董战玲;郑诗华;王小花
来源:中国免疫学杂志 2020 年 36卷 11期