目的:探究转谷氨酰胺酶2(TGM2)对甲状腺癌干细胞(TCSC)紫杉醇化疗敏感性的影响及作用机制.方法:收集甲状腺癌患者新鲜肿瘤组织,分离培养原代甲状腺癌细胞,经无血清培养成悬浮肿瘤细胞球时,流式细胞仪筛选出CD133+表型的TCSC进行后续实验.Western blot检测TCSC中干性基因Nanog、Sox2蛋白表达水平.小干扰RNA技术转染TCSC,分为si-TGM2组和si-NC组,MTS检测TGM2 siRNA转染的TCSC对紫杉醇的敏感性;qRT-PCR法检测紫杉醇处理TCSC后细胞TGM2 mRNA表达.软琼脂克隆实验检测TGM2 siRNA转染对紫杉醇处理的TCSC肿瘤球形成能力的影响;Tunnel凋亡和流式细胞仪检测TGM2 siRNA转染对紫杉醇处理的TCSC凋亡的影响.裸鼠实验检测TGM2对紫杉醇处理TCSC敏感性的影响.Western blot检测TGM2 siRNA转染对紫杉醇处理的TCSC凋亡蛋白caspase-3、Bcl-2表达的影响.结果:流式细胞仪分选出CD133+细胞占全部细胞的1.21％,CD133+细胞中Nanog、Sox2蛋白表达水平显著高于CD133-细胞;沉默TGM2表达可显著提高TCSC对紫杉醇的敏感性;紫杉醇处理的TCSC中TGM2 mRNA表达水平显著高于未经紫杉醇处理的TCSC;沉默TGM2表达显著抑制紫杉醇处理的TCSC肿瘤球形成能力,显著增加紫杉醇处理的TCSC凋亡,提高TCSC对紫杉醇的敏感性,提高紫杉醇处理的TCSC凋亡蛋白casp

作者：林琳；王承芳；洪志军

来源：中国免疫学杂志 2020 年 36卷 13期