目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)TMPO-AS1通过调节miR-204-3p的表达对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响.方法:实时荧光定量PCR(qPCR)检测人肺癌细胞系A549、H1975、H1299和H1650和人正常支气管上皮细胞系HBE中TMPO-AS1的表达水平.采用脂质体转染技术沉默A549细胞中TMPO-AS1,qPCR检测TMPO-AS1和miR-204-3p的表达情况,荧光素酶报告实验检测TMPO-AS1和miR-204-3p的靶向关系,噻唑蓝比色法(MTT)、流式细胞术和Transwell实验分别检测沉默TMPO-AS1对A549细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响,Western blot检测A549细胞中PCNA、Ki-67、Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、MMP-2和MMP-9的表达.结果:人肺癌细胞系中TMPO-AS1的表达水平明显高于人正常支气管上皮细胞系(P<0.05),且肺癌A549细胞中TMPO-AS1的基础表达量最高,选择A549细胞用于后续实验.沉默TMPO-AS1可明显促进miR-204-3p的表达(P<0.05),荧光素酶报告实验显示,TMPO-AS1能够降低miR-204-3p野生型细胞的相对荧光素酶活性(P<0.05).沉默TMPO-AS1能够明显抑制A549细胞增殖和侵袭能力(P<0.05),降低增殖相关蛋白PCNA、Ki-67及侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9的表达(P<0.05);此外,沉默TMPO-AS1可促进A549细胞凋亡及Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9的表达(P<0.05).结

作者：邓俊亮；华美香；陈键腾

来源：中国免疫学杂志 2021 年 37卷 3期