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目的:探讨下调肝受体类似物1(LRH1)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法:采用RT-qPCR和Western blot分别检测人骨肉瘤细胞U2OS和成骨细胞hFOB1.19中LRH1 mRNA和蛋白表达差异;将体外培养的U2OS细胞分为对照组(Ctrl)、阴性对照(NC)-siRNA组和LRH1-siRNA组,RT-qPCR检测各组U2OS细胞中LRH1 mRNA表达,MTT、流式细胞术、Transwell小室和划痕实验分别检测各组U2OS细胞增殖活力、细胞周期分布情况、穿膜细胞数和划痕愈合率,Western blot检测各组U2OS细胞中LRH1和Wnt/β连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、细胞周期素D1(CyclinD1)、c-Myc、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达.结果:与hFOB1.19细胞相比,U2OS细胞中LRH1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05);与NC-siRNA组相比,LRH1-siRNA组U2OS细胞中LRH1 mRNA表达、细胞增殖活力、S期细胞占比、穿膜细胞数、划痕愈合率和LRH1、β-catenin、CyclinD1、c-Myc、MMP-9蛋白表达明显降低,而G0/G1期细胞占比明显升高(P<0.05);NC-siRNA组和Ctrl组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:骨肉瘤U2OS细胞中LRH1表达上调,下调其表达可通过诱导细胞周期阻滞抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、减弱U2OS细胞侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化

作者:曲野;刘立柱;徐瑞敏;吴开弟;代伟宏

来源:中国免疫学杂志 2022 年 38卷 7期

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作者:
曲野;刘立柱;徐瑞敏;吴开弟;代伟宏
来源:
中国免疫学杂志 2022 年 38卷 7期
标签:
骨肉瘤 肝受体类似物1 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 Wnt/β连环蛋白信号通路
目的:探讨下调肝受体类似物1(LRH1)对骨肉瘤U2OS细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其机制.方法:采用RT-qPCR和Western blot分别检测人骨肉瘤细胞U2OS和成骨细胞hFOB1.19中LRH1 mRNA和蛋白表达差异;将体外培养的U2OS细胞分为对照组(Ctrl)、阴性对照(NC)-siRNA组和LRH1-siRNA组,RT-qPCR检测各组U2OS细胞中LRH1 mRNA表达,MTT、流式细胞术、Transwell小室和划痕实验分别检测各组U2OS细胞增殖活力、细胞周期分布情况、穿膜细胞数和划痕愈合率,Western blot检测各组U2OS细胞中LRH1和Wnt/β连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白β-catenin、细胞周期素D1(CyclinD1)、c-Myc、基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达.结果:与hFOB1.19细胞相比,U2OS细胞中LRH1 mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05);与NC-siRNA组相比,LRH1-siRNA组U2OS细胞中LRH1 mRNA表达、细胞增殖活力、S期细胞占比、穿膜细胞数、划痕愈合率和LRH1、β-catenin、CyclinD1、c-Myc、MMP-9蛋白表达明显降低,而G0/G1期细胞占比明显升高(P<0.05);NC-siRNA组和Ctrl组上述指标差异无统计学意义(P>0.05).结论:骨肉瘤U2OS细胞中LRH1表达上调,下调其表达可通过诱导细胞周期阻滞抑制骨肉瘤U2OS细胞增殖、减弱U2OS细胞侵袭和迁移,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化