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目的:探讨外泌体在肝细胞癌(HCC)细胞与巨噬细胞间是否存在活性物质交通作用,分析肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与HCC细胞转移的关系及机制.方法:采用超速离心法从Huh-7和RAW264.7细胞的培养基中提取外泌体,Western blot和透射电镜进行外泌体鉴定;激光共聚焦显微镜对外泌体与受体细胞结合内化进行追踪;qRT-PCR及ELISA检测巨噬细胞表型变化;miRNA模拟物进行功能性实验验证其作用;细胞划痕及Transwell试验检测TAMs对HCC细胞迁移及侵袭能力的影响.结果:HCC细胞外泌体可被巨噬细胞内吞;肝癌细胞外泌体及miR-151模拟物处理的巨噬细胞M2型标志物CD206、Arg-1 mRNA表达及IL-10、TGF-β蛋白表达显著高于对照组(P<0.05);TAMs外泌体处理组HCC细胞迁移及侵袭能力高于其他组(P<0.05).结论:HCC细胞来源外泌体miR-151可诱导巨噬细胞极化为TAMs,TAMs对肝癌细胞迁移及侵袭有促进作用.

作者:孙文兵;邢艳珑;涂蓉;吴嗣泽

来源:中国免疫学杂志 2022 年 38卷 12期

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作者:
孙文兵;邢艳珑;涂蓉;吴嗣泽
来源:
中国免疫学杂志 2022 年 38卷 12期
标签:
肝细胞癌 肿瘤相关巨噬细胞 外泌体 转移 肿瘤微环境 miRNA
目的:探讨外泌体在肝细胞癌(HCC)细胞与巨噬细胞间是否存在活性物质交通作用,分析肿瘤微环境中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与HCC细胞转移的关系及机制.方法:采用超速离心法从Huh-7和RAW264.7细胞的培养基中提取外泌体,Western blot和透射电镜进行外泌体鉴定;激光共聚焦显微镜对外泌体与受体细胞结合内化进行追踪;qRT-PCR及ELISA检测巨噬细胞表型变化;miRNA模拟物进行功能性实验验证其作用;细胞划痕及Transwell试验检测TAMs对HCC细胞迁移及侵袭能力的影响.结果:HCC细胞外泌体可被巨噬细胞内吞;肝癌细胞外泌体及miR-151模拟物处理的巨噬细胞M2型标志物CD206、Arg-1 mRNA表达及IL-10、TGF-β蛋白表达显著高于对照组(P<0.05);TAMs外泌体处理组HCC细胞迁移及侵袭能力高于其他组(P<0.05).结论:HCC细胞来源外泌体miR-151可诱导巨噬细胞极化为TAMs,TAMs对肝癌细胞迁移及侵袭有促进作用.