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目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)干预通过DNA甲基化途径对于局灶性脑缺血大鼠大脑皮质区神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响.方法 将36只健康雄性成年清洁级Sprague Dawley(SD)大鼠完全随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组(MCAO组)、Hcy+MCAO组,每组12只.在MCAO建模手术之前的7 d内,假手术组与MCAO组腹腔注射等渗盐水[5 ml/(kg·d)],Hcy+MCAO组注射2%Hcy溶液[5 ml/(kg·d)].采用改良Longa法构建MCAO模型.在MCAO模型建立后第5天开始,连续3 d注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶[BrdU,50 mg/(kg·d)]标记新生成的神经细胞.MCAO手术后7 d,苏木素-伊红染色观察大脑皮质区的病理变化.分别在手术后7 d和14 d采用免疫荧光双标双皮质素(DCX)/BrdU、神经元核蛋白(NeuN)/BrdU检测内源性NSCs的增殖和分化情况,采用免疫荧光双标DCX/5-甲基胞嘧啶(5mC)和NeuN/5mC检测大脑皮质DNA甲基化水平.结果 3组大鼠大脑皮质区正常神经细胞数量差异有统计学意义(F=49.55,P<0.01),MCAO组正常神经细胞数量[(54±10)个/视野]明显少于假手术组[(99±13)个/视野],Hcy+MCAO组正常神经细胞数量[(32±8)个/视野]明显少于MCAO组,差异均有统计学意义(均P<0.05).MCAO组皮质区DCX+/BrdU+、NeuN+/BrdU+、DCX+/5mC+和NeuN+/5mC+数量[分别为(7.8±1.1)、(9.

作者:康军;苟芸;叶琦;梁晓珊;石琳然;王萌;李可;张绪梅

来源:中国脑血管病杂志 2021 年 18卷 9期

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作者:
康军;苟芸;叶琦;梁晓珊;石琳然;王萌;李可;张绪梅
来源:
中国脑血管病杂志 2021 年 18卷 9期
标签:
局灶性脑缺血;神经干细胞;神经发生;DNA甲基化;同型半胱氨酸
目的 探讨同型半胱氨酸(Hcy)干预通过DNA甲基化途径对于局灶性脑缺血大鼠大脑皮质区神经干细胞(NSCs)增殖分化的影响.方法 将36只健康雄性成年清洁级Sprague Dawley(SD)大鼠完全随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞(MCAO)模型组(MCAO组)、Hcy+MCAO组,每组12只.在MCAO建模手术之前的7 d内,假手术组与MCAO组腹腔注射等渗盐水[5 ml/(kg·d)],Hcy+MCAO组注射2%Hcy溶液[5 ml/(kg·d)].采用改良Longa法构建MCAO模型.在MCAO模型建立后第5天开始,连续3 d注射5-溴-2-脱氧尿嘧啶[BrdU,50 mg/(kg·d)]标记新生成的神经细胞.MCAO手术后7 d,苏木素-伊红染色观察大脑皮质区的病理变化.分别在手术后7 d和14 d采用免疫荧光双标双皮质素(DCX)/BrdU、神经元核蛋白(NeuN)/BrdU检测内源性NSCs的增殖和分化情况,采用免疫荧光双标DCX/5-甲基胞嘧啶(5mC)和NeuN/5mC检测大脑皮质DNA甲基化水平.结果 3组大鼠大脑皮质区正常神经细胞数量差异有统计学意义(F=49.55,P<0.01),MCAO组正常神经细胞数量[(54±10)个/视野]明显少于假手术组[(99±13)个/视野],Hcy+MCAO组正常神经细胞数量[(32±8)个/视野]明显少于MCAO组,差异均有统计学意义(均P<0.05).MCAO组皮质区DCX+/BrdU+、NeuN+/BrdU+、DCX+/5mC+和NeuN+/5mC+数量[分别为(7.8±1.1)、(9.