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目的 探讨c-Met shRNA表达载体对人黑素瘤A375细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 以pGenesil-1质粒为载体,以c-Met为靶基因,构建shRNA表达载体,并将其转染至体外培养的人黑素瘤A375细胞中.倒置相差显微镜下观察经干扰后瘤细胞的形态学变化;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测转染细胞c-Met基因和蛋白的表达水平;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测转染后细胞的生长活力;Transwell小室法测定转染细胞体外侵袭能力.结果 构建了pGenesil-1-c-Met shRNA重组质粒,并成功转染A375细胞.转染后A375细胞缩小,变圆.RT-PCR显示转染后c-Met mRNA的表达显著降低,以48h为著,下降近64

作者:曾静;周辉;段德鉴;王超;景海霞;喻标;吴蕊;田斌;唐吉云

来源:中国皮肤性病学杂志 2010 年 24卷 9期

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作者:
曾静;周辉;段德鉴;王超;景海霞;喻标;吴蕊;田斌;唐吉云
来源:
中国皮肤性病学杂志 2010 年 24卷 9期
标签:
黑素瘤细胞 RNA干扰 c-Met 增殖 侵袭
目的 探讨c-Met shRNA表达载体对人黑素瘤A375细胞增殖、侵袭能力的影响.方法 以pGenesil-1质粒为载体,以c-Met为靶基因,构建shRNA表达载体,并将其转染至体外培养的人黑素瘤A375细胞中.倒置相差显微镜下观察经干扰后瘤细胞的形态学变化;采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法分别检测转染细胞c-Met基因和蛋白的表达水平;四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测转染后细胞的生长活力;Transwell小室法测定转染细胞体外侵袭能力.结果 构建了pGenesil-1-c-Met shRNA重组质粒,并成功转染A375细胞.转染后A375细胞缩小,变圆.RT-PCR显示转染后c-Met mRNA的表达显著降低,以48h为著,下降近64