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目的观察转染反义DNMT3b基因真核表达质粒对人胆管癌细胞QBC939生长的影响,初步探讨DNMT3b基因在胆管癌发生中的作用.方法构建反义DNMT3b基因真核表达质粒,用脂质体介导法将其转入人胆管癌细胞株QBC939;Western blot检测转染前后DNMT3b蛋白表达的变化;MTT法和软琼脂克隆形成试验观察细胞的生长增殖能力;流式细胞术观察细胞生长周期及凋亡率的变化.结果转染反义基因能使DNMT3b蛋白表达水平降低;转染反义DNMT3b基因不能抑制QBC939的生长曲线,对其软琼脂克隆形成率亦无影响(P=0.717);转染反义DNMT3b基因不能改变QBC939的细胞周期和促进细胞凋亡(P=0.089).结论转染反义DNMT3b基因真核表达质粒可下调DNMT3b在QBC939细胞中的表达水平,但对QBC939的生长和增殖无影响,也不能改变QBC939的细胞周期和促进细胞凋亡的发生.

作者:左石;邹声泉;陈勇军;陈波;唐启彬

来源:中国普通外科杂志 2006 年 15卷 3期

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作者:
左石;邹声泉;陈勇军;陈波;唐启彬
来源:
中国普通外科杂志 2006 年 15卷 3期
标签:
胆管肿瘤/遗传学 胆管癌细胞 反义调控DNA甲基转移酶
目的观察转染反义DNMT3b基因真核表达质粒对人胆管癌细胞QBC939生长的影响,初步探讨DNMT3b基因在胆管癌发生中的作用.方法构建反义DNMT3b基因真核表达质粒,用脂质体介导法将其转入人胆管癌细胞株QBC939;Western blot检测转染前后DNMT3b蛋白表达的变化;MTT法和软琼脂克隆形成试验观察细胞的生长增殖能力;流式细胞术观察细胞生长周期及凋亡率的变化.结果转染反义基因能使DNMT3b蛋白表达水平降低;转染反义DNMT3b基因不能抑制QBC939的生长曲线,对其软琼脂克隆形成率亦无影响(P=0.717);转染反义DNMT3b基因不能改变QBC939的细胞周期和促进细胞凋亡(P=0.089).结论转染反义DNMT3b基因真核表达质粒可下调DNMT3b在QBC939细胞中的表达水平,但对QBC939的生长和增殖无影响,也不能改变QBC939的细胞周期和促进细胞凋亡的发生.