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目的 探讨构建携带大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)的重组腺病毒载体方法 ,为后续的基因转染研究作准备.方法 采用RT-PCR扩增的方法 获取鼠源性的VEGF,并克隆入穿梭质粒pDC316.构建的质粒pDC316-VEGF经酶切及测序鉴定正确后,通过lipofectamine2000的介导与腺病毒包装质粒pBHGE3共转染至人胚肾细胞HEK293,经同源重组后获得携带鼠VEGF的重组腺病毒VDC316-VEGF.应用PCR鉴定重组腺病毒,空斑传代纯化病毒并反复冻融扩增病毒.以50

作者:邹君杰;杨宏宇;祁泓;章希炜

来源:中国普通外科杂志 2008 年 17卷 6期

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作者:
邹君杰;杨宏宇;祁泓;章希炜
来源:
中国普通外科杂志 2008 年 17卷 6期
标签:
血管内皮生长因子 腺病毒载体 基因转染
目的 探讨构建携带大鼠血管内皮细胞生长因子(VEGF)的重组腺病毒载体方法 ,为后续的基因转染研究作准备.方法 采用RT-PCR扩增的方法 获取鼠源性的VEGF,并克隆入穿梭质粒pDC316.构建的质粒pDC316-VEGF经酶切及测序鉴定正确后,通过lipofectamine2000的介导与腺病毒包装质粒pBHGE3共转染至人胚肾细胞HEK293,经同源重组后获得携带鼠VEGF的重组腺病毒VDC316-VEGF.应用PCR鉴定重组腺病毒,空斑传代纯化病毒并反复冻融扩增病毒.以50