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目的:探讨siRNA干扰叉头框C2(FOXC2)对乳腺癌中肿瘤干细胞(CSC)标志物CD44 mRNA及蛋白表达的影响.方法:常规培养乳腺癌MCF-7细胞株,再通过乳腺球形成实验培养、筛选乳腺癌CSC;将FOXC2-siRNA或阴性对照siRNA慢病毒载体转染至乳腺癌CSC,同时将转染载体的CSC作为空白对照.通过real time RT-PCR和Western blot检测FOXC2-siRNA对FOXC2的干扰效应,再通过real time RT-PCR和Western blot分别检测CD44 mRNA和蛋白在各组细胞中的表达,结果均以空白对照的表达量作为参照进行分析.结果:从MCF-7细胞株中成功培养出乳腺癌CSC.与转染阴性对照siRNA的乳腺癌CSC比较,转染FOXC2-siRNA的乳腺癌CSC中FOXC2 mRNA和蛋白表达均明显降低(P=0.00509;p=0.00001),同时CD44 mRNA及蛋白的表达也均明显降低(P=0.00848;P=0.00218).结论:干扰乳腺癌CSC中FOXC2基因的表达能够抑制乳腺癌CSC中CD44 mRNA及蛋白的表达,FOXC2信号转导通路可能通过调控CD44来介导乳腺癌CSC的增殖、分化.

作者:王健;徐杰;吕健东

来源:中国普通外科杂志 2013 年 22卷 11期

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作者:
王健;徐杰;吕健东
来源:
中国普通外科杂志 2013 年 22卷 11期
标签:
乳腺肿瘤 肿瘤干细胞 叉头框C2 抗原,CD44 Breast Neoplasms Neoplastic Stem Cells Forkhead Box C2 Antigens,CD44
目的:探讨siRNA干扰叉头框C2(FOXC2)对乳腺癌中肿瘤干细胞(CSC)标志物CD44 mRNA及蛋白表达的影响.方法:常规培养乳腺癌MCF-7细胞株,再通过乳腺球形成实验培养、筛选乳腺癌CSC;将FOXC2-siRNA或阴性对照siRNA慢病毒载体转染至乳腺癌CSC,同时将转染载体的CSC作为空白对照.通过real time RT-PCR和Western blot检测FOXC2-siRNA对FOXC2的干扰效应,再通过real time RT-PCR和Western blot分别检测CD44 mRNA和蛋白在各组细胞中的表达,结果均以空白对照的表达量作为参照进行分析.结果:从MCF-7细胞株中成功培养出乳腺癌CSC.与转染阴性对照siRNA的乳腺癌CSC比较,转染FOXC2-siRNA的乳腺癌CSC中FOXC2 mRNA和蛋白表达均明显降低(P=0.00509;p=0.00001),同时CD44 mRNA及蛋白的表达也均明显降低(P=0.00848;P=0.00218).结论:干扰乳腺癌CSC中FOXC2基因的表达能够抑制乳腺癌CSC中CD44 mRNA及蛋白的表达,FOXC2信号转导通路可能通过调控CD44来介导乳腺癌CSC的增殖、分化.