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目的:探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对人正常肝细胞中生物钟基因表达的影响.方法:分别将HBx表达质粒(pcDNA3.1-HBx)与空载体质粒(pcDNA3.1)转染入人正常肝细胞系L02后,用RT-PCR与Western blot法检测细胞HBx mRNA与蛋白的表达;real-time PCR检测细胞中生物钟基因CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、CKIε的表达.结果:RT-PCR与Western blot结果显示,L02细胞转染HBx表达质粒后有明显的HBx mRNA与蛋白表达,而转染空载体质粒的L02细胞无HBx mRNA与蛋白表达.与转染空载体质粒的L02细胞比较,转染HBx表达质粒的L02细胞CLOCK与Cry1的mRNA表达明显升高,而BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry2、CKIε的mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:HBx能使正常肝细胞中的生物钟基因表达发生改变,破坏肝细胞正常的生物节律,这可能为其导致肝癌形成的机制之一.

作者:金涛;刘平;黄早早;李常海;姚弘毅;柳湘洁;杨盛力

来源:中国普通外科杂志 2014 年 23卷 7期

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作者:
金涛;刘平;黄早早;李常海;姚弘毅;柳湘洁;杨盛力
来源:
中国普通外科杂志 2014 年 23卷 7期
标签:
癌,肝细胞 乙型肝炎病毒X 生物钟 Carcinoma, Hepatocellular Hepatitis B Virus X Protein Biological Clocks
目的:探讨乙肝病毒X蛋白(HBx)对人正常肝细胞中生物钟基因表达的影响.方法:分别将HBx表达质粒(pcDNA3.1-HBx)与空载体质粒(pcDNA3.1)转染入人正常肝细胞系L02后,用RT-PCR与Western blot法检测细胞HBx mRNA与蛋白的表达;real-time PCR检测细胞中生物钟基因CLOCK、BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、CKIε的表达.结果:RT-PCR与Western blot结果显示,L02细胞转染HBx表达质粒后有明显的HBx mRNA与蛋白表达,而转染空载体质粒的L02细胞无HBx mRNA与蛋白表达.与转染空载体质粒的L02细胞比较,转染HBx表达质粒的L02细胞CLOCK与Cry1的mRNA表达明显升高,而BMAL1、Per1、Per2、Per3、Cry2、CKIε的mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论:HBx能使正常肝细胞中的生物钟基因表达发生改变,破坏肝细胞正常的生物节律,这可能为其导致肝癌形成的机制之一.