目的 利用实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)mRNA的表达.探讨胰岛素和高糖对人THP-1细胞分化的巨噬细胞ACAT-1 mRNA表达的影响.方法 体外培养人单核细胞株THP-1细胞,由佛波醇肉豆蔻酸乙酸盐(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,后者再由胰岛素和高糖共同干预不同时间(0、6、12、24、48 h),用实时定量PCR检测ACAT-1 mRNA表达.结果 胰岛素和高糖共同作用不同时间后巨噬细胞ACAT-1 mRNA的表达量间差别有显著性意义(P<0.01),作用12 h与0、6、24、48 h的ACAT-1 mRNA表达量间差别均有显著性意义(P<0.01),作用48 h的ACAT-1 mRNA表达量与0 h相比差别无显著性意义(P>0.05).结论 胰岛素和高糖共同作用下,巨噬细胞ACAT-1 mRNA表达逐渐增加,12 h达到高峰,然后逐渐下降,48 h恢复到0 h时水平.成功建立和应用实时定量PCR检测巨噬细胞ACAT-1 mRNA水平是准确评价巨噬细胞功能的方法之一.
作者:陆菡;成蓓;何平;王彦富;曾永利;葛晶
来源:中国全科医学 2007 年 10卷 4期