目的:探讨生物活性肽Apelin对单侧输尿管结扎( UUO)小鼠肾脏纤维化的影响及相关机制,分析在肾脏纤维化时血清和肾脏局部Apelin/APJ系统的代偿性变化。方法2014年1月选取7周龄雄性C57Bl/6j小鼠共60只,构建UUO的小鼠模型,并设立假手术组( Sham)作为对照。术后每天给小鼠腹腔注射Apelin-13(0.1μmol/kg)或等量0.9%氯化钠溶液( vehicle )。根据小鼠手术方式和术后用药情况分为4组(15只/组): Sham +vehicle组、Sham +Apelin组、 UUO +vehicle组、 UUO +Apelin组。术后2周将小鼠处死,取手术侧肾脏进行检测。采用Masson染色观察肾脏纤维化程度;采用实时荧光定量 PCR ( RT-PCR )法检测肾脏细胞外基质胶原〔纤维连接蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原(Collagen I)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)〕表达水平以及肾脏Apelin、 APJ表达水平;采用Western blotting法检测肾小管上皮细胞标志物上皮细胞钙黏蛋白( E-cadherin)、间充质细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平以及转化生长因子β( TGF-β)/Smads 信号通路的主要信号分子( TGF-β1、 TGF-βR1、p-Smad2)表达水平;采用ELISA法检测小鼠血清Apelin表达水平。结果4组小鼠肾脏纤维化程度比较,差异有统计学意义( P <
作者:王丽妍;刁宗礼;张启东;张育;刘文虎
来源:中国全科医学 2016 年 19卷 9期