目的利用噬菌体随机肽库技术筛选弓形虫抗原的有效表位,并探讨其免疫保护效果.方法用纯化的弓形虫免疫兔血清IgG对噬菌体12肽库进行三轮筛选,对获得的日的噬菌体用间接ELISA和Dot-ELISA检测其特异性,并对其中的某些克隆进行Western-blot分析和序列测定;用混和噬菌体克隆及强阳性袁位克隆免疫BABL/c小鼠,间接ELISA法测定其特异性抗体滴度,攻击感染后观察小鼠存活情况.结果经三轮筛选,特异性噬菌体得到富集,随机挑取18个克隆经间接ELISA和Dot-ELISA鉴定,有16个克隆能与弓形虫免疫兔血清lgG呈特异性反应.Western-b1ot分析显示P2克隆能被免抗弓形虫血清所识别,具有类似于弓形虫抗原的免疫原性,其序列为5'-CTTCAGTTGGATCGGGCTCCGTTTTGGAAT CAGGGT-3',与GenBank的弓形虫已知序列无一级结构的同源性;与原肽库对照组相比,P2实验组和P总实验组免疫小鼠均能诱导出较高滴度的IgG抗体,抗攻击感染后小鼠的存活率及存活时间也均高于对照组.结论利用噬菌体随机肽库技术获得了弓形虫抗原的有效模拟表位,这些表位能诱导对弓形虫的部分保护作用.
作者：林绮萍；吴少庭；翁亚彪；袁仕善；温见翔；张仁利；高世同；黄达娜；雷明军；潘晖榕；秦莉
来源：中国热带医学 2004 年 4卷 5期
