目的在大肠埃希菌(E.coli)中表达、纯化间日疟原虫裂殖子表面蛋1 C端重组蛋白(rGST-PvMSP1C)作为诊断抗原,评价其在间日疟血清学诊断中的应用价值. 方法将含有重组质粒pGEX-4T-2/PvMSP1C的工程菌E.coli BL21(DE3) 以IPTG进行诱导表达,表达产物以SDS-PAGE与Western-blot免疫印迹进行鉴定;采用GST融合蛋白层析柱进行分离纯化;以纯化重组蛋白包被酶标板,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测间日疟患者血清中的特异性IgG抗体. 结果含有重组质粒pGEX-4T-2/PvMSP1C工程菌经IPTG诱导表达的rGST-PvMSP1C重组蛋白大小约63ku,能够被间日疟患者的血清所识别.纯化的重组蛋白SDS-PAGE电泳显示一条预期大小的蛋白条带;以重组蛋白作诊断抗原,67份镜检阳性的间日患者血清标本ELISA均为阳性,55份健康人血清ELISA均为阴性,5份恶性疟患者血清及7份血吸虫患者血清检测结果亦为阴性. 结论在大肠埃希菌中表达纯化的间日疟原虫rGST-PvMSP1C蛋白具有免疫反应性,以其作为诊断抗原建立的血清中特异性IgG抗体ELISA检测方法具有良好敏感性和特异性,在间日疟的免疫学诊断中具有一定的推广使用价值.
作者：高世同；张仁利；刘会娟；耿艺介；黄达娜；刘尚林；吴少庭
来源：中国热带医学 2006 年 6卷 1期
