目的 初步探讨乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)和肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染人神经细胞的内吞途径机制.方法 通过蛋白酶K实验检测JEV和EV71感染人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的入侵速率.采用MTT法检测针对不同内吞途径关键分子的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)以及化学抑制剂对SH-SY5Y细胞的细胞毒性.用JEV和EV71感染siRNA或化学抑制剂预处理的SH-SY5Y细胞,荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测不同处理对两种病毒mRNA和靶蛋白表达的影响.结果 确定针对网格蛋白重链的siRNA (siCHC)最高工作浓度为50nmol/L,针对小窝蛋白1的siRNA (siCAV1)的最高工作浓度为100 nmol/L.qRT-PCR结果显示,siCHC转染神经细胞能抑制EV71 mRNA的表达(t=17.153,P＜0.01),但不能抑制JEV mRNA的表达(P＞0.05);而siCAV1转染神经细胞能抑制JEV mRNA的表达(t=11.406,P＜0.01),但不能抑制EV71 mRNA的表达(P＞0.05).针对网格蛋白途径的化学抑制剂氯丙嗪(Chlorpromazine)可抑制EV71 mRNA的表达(t=4.114,P＜0.05),且呈剂量依赖性,而氯丙嗪并不影响JEV mRNA的表达(P＞0.05);针对小窝途径的化学抑制剂非律平(Filipin)可抑制JEV mRNA的表达(t=4.064,P＜0.05),且呈剂量依赖性,而非律平并不影

作者：谭雨豪；吴月明；徐庆强；朱耐伟；彭浩然；朱勇喆

来源：中国热带医学 2016 年 16卷 8期