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目的 探讨环状RNA在血管平滑肌细胞增殖过程中的作用.方法 在体外原代培养小鼠血管平滑肌细胞,采用不同浓度(10~50 ng,/mL)的血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖.在给予PDGF-BB诱导48 h后,采用细胞计数和BrdU法检测血管平滑肌细胞增殖;同时采用高速离心法分离培养液中外泌体,提取外泌体中总RNA,利用Real-time PCR法检测外泌体中6种环状RNA(环状RNA 30741、1853、723、3069、1776、1092)的表达情况,在Circbase等数据库对环状RNA的靶小分子RNA进行生物信息学分析.结果 与对照组(Vehicle)相比,给予10ng/mL PDGF-BB刺激后血管平滑肌细胞的数目和BrdU OD值没有明显变化(vs Vehicle,P>0.05),20~50 ng/mL的PDGF-BB刺激后血管平滑肌细胞数目和BrdU OD值呈浓度依赖性增加(vs Vehicle,P<0.05).在血管平滑肌细胞增殖过程中,环状RNA 1853、723、3069、1776、1092的表达水平无明显变化(P>0.05),环状RNA30741的表达水平上调(P<0.05),且环状RNA 30741的mRNA水平与VSMC的细胞数呈显著正相关性(P<0.05).生物信息学分析提示环状RNA 30741的靶小分子RNA包括小分子RNA-21等.结论 环状RNA 30741可能参与了血管平滑肌细胞的增殖过程.

作者:熊玮;骆瑜;刘峰;刘华东;李江华;董少红

来源:中国热带医学 2018 年 18卷 5期

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作者:
熊玮;骆瑜;刘峰;刘华东;李江华;董少红
来源:
中国热带医学 2018 年 18卷 5期
标签:
血管平滑肌细胞 环状RNA 增殖 血小板源性生长因子
目的 探讨环状RNA在血管平滑肌细胞增殖过程中的作用.方法 在体外原代培养小鼠血管平滑肌细胞,采用不同浓度(10~50 ng,/mL)的血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导血管平滑肌细胞(VSMC)增殖.在给予PDGF-BB诱导48 h后,采用细胞计数和BrdU法检测血管平滑肌细胞增殖;同时采用高速离心法分离培养液中外泌体,提取外泌体中总RNA,利用Real-time PCR法检测外泌体中6种环状RNA(环状RNA 30741、1853、723、3069、1776、1092)的表达情况,在Circbase等数据库对环状RNA的靶小分子RNA进行生物信息学分析.结果 与对照组(Vehicle)相比,给予10ng/mL PDGF-BB刺激后血管平滑肌细胞的数目和BrdU OD值没有明显变化(vs Vehicle,P>0.05),20~50 ng/mL的PDGF-BB刺激后血管平滑肌细胞数目和BrdU OD值呈浓度依赖性增加(vs Vehicle,P<0.05).在血管平滑肌细胞增殖过程中,环状RNA 1853、723、3069、1776、1092的表达水平无明显变化(P>0.05),环状RNA30741的表达水平上调(P<0.05),且环状RNA 30741的mRNA水平与VSMC的细胞数呈显著正相关性(P<0.05).生物信息学分析提示环状RNA 30741的靶小分子RNA包括小分子RNA-21等.结论 环状RNA 30741可能参与了血管平滑肌细胞的增殖过程.