目的 分析结核分枝杆菌H37Rv感染诱导宿主巨噬细胞表达miRNA的变化,进而验证差异miRNA对结核分枝杆菌感染的临床诊断意义.方法 使用H37Rv菌株感染人巨噬细胞系THP-1细胞后,收集12h、24h和48 h细胞并提取总RNA,进行miRNA微阵列芯片分析;再将临床分离的120株不同个体来源的结核分枝杆菌菌株与THP-1细胞共培养,使用实时定量PCR (real time-PCR,rt-PCR)验证差异miRNA的表达水平;随后收集结核患者的痰液标本处理后,提取总RNA,进行实时荧光定量PCR检测痰液中的差异表达的miRNA水平.结果 H37Rv体外刺激THP-1细胞,使用miRNA微阵列芯片分析,结果显示miR-155、miR-29b-1*、miR-150、miR-146a、miR-212和miR-483-5p共计6个miRNAs水平在3个时间点升高均较为明显;将来自不同区域的120株结核菌株分别与THP-1细胞的共培养24 h,检测发现miR-155表达水平最高;以miRNh-155为检测靶标,对68例结核患者的痰液进行检测,灵敏度和特异度分别为94.1％和93.8％.其灵敏度高于痰涂片的22.1％和结核抗体的83.8％,差异具有统计学意义(P＜0.05).但与ELISpot法的97.1％,差异无统计学意义(P＞0.05).在对痰涂片阳性结果与miRNA检测结果相关性分析中,发现miR-155其表达水平与痰涂片阳性等级呈正相关(R2=0.743,P＜0.05).结论 此研究提示miR-15

作者：陈思达；卓宋明；李娜；黄震；季乐财；唐晓磊

来源：中国热带医学 2020 年 20卷 4期