目的构建恙虫病东方体sta56基因的重组表达质粒,并在E.coli中表达Sta56重组抗原.方法从恙虫病东方体Karp株基因组中扩增出sta56基因的ORF及其中长1 053bp的大片段,用TA克隆技术将此大片段克隆,并以重组质粒为模板,扩增编码Sta56抗原亲水氨基酸区的一段长342bp的DNA,插入pProEX HTb载体,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western blot进行分析.结果从恙虫病东方体基因组中扩增出sta56基因的ORF,以截短片段构建了重组表达质粒pHTbOt342,SDS-PAGE显示蛋白表达带的分子量约为15.4kDa,Western blot证实该融合蛋白能被恙虫病患者阳性血清所识别.结论在大肠杆菌中表达的Sta56重组蛋白具有免疫反应性.
作者：邓艳琴；严延生；何似；翁育伟；陈亮
来源：中国人兽共患病杂志 2001 年 17卷 6期
