目的克隆并在巴斯德毕赤酵母中表达猪囊尾蚴抗原cC1.方法用PCR法在cC1cDNA5′端引入所需限制酶位点和酵母分泌信号肽,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-cC1.采用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 PCR产物经测序无误,pPIC9-cC1和pPIC9k-cC1酶切分析与预期相符,获取863个酵母阳性重组克隆及9个高拷贝转化子.表达产物cC1的分子量约42kDa,占分泌总蛋白80
作者：杨湘越；孙树汉；陈蕊雯；郭瀛军；颜宏利
来源：中国人兽共患病杂志 2002 年 18卷 3期
