目的建立特异敏感的快速检验普氏立克次体PCR检测方法,并能与莫氏立克次体相区分.方法采用种特异性巢式PCR方法,进行实验室模拟检测.结果以普氏立克次体的rpa14/16基因为靶标设计了两对引物;该引物特异性实验表明仅普氏立克次体特异性片段可以扩增出来,其余相关立克次体均扩增不出,尤其可鉴别其同群的莫氏立克次体;敏感性测试结果可检测出63fg的普氏立克次体DNA,可检测出0.05个鸡胚半数感染量(CEID50)的立克次体;对人工模拟的小鼠脏器研磨液、血液标本检测发现该法在血液标本中的检测敏感性下降3~4个滴度.结论我们建立的巢式PCR可快速检验普氏立克次体,有望为临床确诊流行性斑疹伤寒和排除鼠型斑疹伤寒提供实验室依据.
作者:崔红;宫占威;张雪颖;陈梅玲;陈香蕊
来源:中国人兽共患病杂志 2002 年 18卷 3期