目的为探讨胞浆Ca2+是否为一氧化氮(Nitric Oxide,NO)诱导弓形虫速殖子凋亡的重要信号分子.方法采用脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)介导的缺口末端标记法(TUNEL)、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测凋亡以及应用Fura-2荧光负载技术测定胞浆游离钙浓度[Ca2+]i.结果 NO供体亚硝基铁氰化钠(Na2Fe(CN)5NO,SNP)诱导弓形虫速殖子凋亡过程中胞浆[Ca2+]i明显升高.NO清除剂,N-乙酰半胱氨酸能明显抑制SNP诱导的速殖子凋亡及SNP诱导的速殖子胞浆[Ca2+]i升高,而不含NO的SNP类似物,铁氰化钾[K3Fe(CN)6]不能诱导速殖子凋亡及其胞浆[Ca2+]i升高.胞外钙螯合剂EGTA,和L型电压依赖性钙通道阻滞剂异搏定,完全或部分抑制SNP引起的速殖子胞浆[Ca2+]i升高,胞内钙螯合剂BAPTA/AM及胞外钙螯合剂EGTA明显抑制SNP诱导的速殖子凋亡.结论证明NO的供体SNP诱导弓形虫速殖子凋亡主要通过促进胞外钙内流,胞浆[Ca2+]i升高所致.
作者:林京;林建银;彭碧文;胡建石
来源:中国人兽共患病杂志 2003 年 19卷 1期