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目的将恶性疟原虫FCC1/HN株(CQS)Pfmdr1和Cg1全基因编码区克隆入测序载体,测定其序列,为以后研究其与疟原虫耐药性的关系奠定基础.方法利用PCR扩增技术,分3个片段从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中,特异扩增Pfmdr1全基因编码序列;分2个片段特异扩增Cg1全基因编码序列.扩增产物经纯化回收后,T-A克隆入测序载体pMD18-T,转化大肠杆菌(E.coli)JM109,筛选阳性克隆,并进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒,用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测定.结果 CQS FCC1/HN株Pfmdr1基因序列与CQS Fc27株同源性高,全长4248bp,编码1415个氨基酸;测得Cg1基因全长为2820bp,编码939个氨基酸,存在串联α重复序列.结论恶性疟原虫FCC1/HN(CQS)株Pfmdr1和Cg1全基因编码序列的测定,为以后研究耐药性虫株的上述基因以及它们与疟原虫耐药性的关系奠定基础.

作者:马长玲;余新炳;单志新;卞国武;吴忠道;徐劲

来源:中国人兽共患病杂志 2003 年 19卷 1期

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作者:
马长玲;余新炳;单志新;卞国武;吴忠道;徐劲
来源:
中国人兽共患病杂志 2003 年 19卷 1期
标签:
恶性疟原虫 耐药性 T-A克隆 序列分析
目的将恶性疟原虫FCC1/HN株(CQS)Pfmdr1和Cg1全基因编码区克隆入测序载体,测定其序列,为以后研究其与疟原虫耐药性的关系奠定基础.方法利用PCR扩增技术,分3个片段从恶性疟原虫FCC1/HN株基因组DNA中,特异扩增Pfmdr1全基因编码序列;分2个片段特异扩增Cg1全基因编码序列.扩增产物经纯化回收后,T-A克隆入测序载体pMD18-T,转化大肠杆菌(E.coli)JM109,筛选阳性克隆,并进行双酶切及PCR扩增鉴定,获得阳性重组质粒,用Sanger双脱氧链终止法进行DNA测定.结果 CQS FCC1/HN株Pfmdr1基因序列与CQS Fc27株同源性高,全长4248bp,编码1415个氨基酸;测得Cg1基因全长为2820bp,编码939个氨基酸,存在串联α重复序列.结论恶性疟原虫FCC1/HN(CQS)株Pfmdr1和Cg1全基因编码序列的测定,为以后研究耐药性虫株的上述基因以及它们与疟原虫耐药性的关系奠定基础.