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目的了解人B组轮状病毒近20年来基因变异情况,为轮状病毒疫苗的研制提供依据.方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增人B组轮状病毒WH-1株NSP2基因489bp的片断,并将其克隆到载体pUCmT,转化感受态细胞One-shot Top10F',提取转化菌质粒经限制性内切酶PstI酶切分析,筛选出阳性菌提取质粒,对插入片段进行了测序和核苷酸序列分析.结果利用GeneBee与其他B组轮状病毒株ADRV(人)、CAL-1(人)及IDIR(鼠)的NSP2基因进行同源性比较,发现毒株WH-1与ADRV核苷酸序列的同源性达99.8

作者:唐少文;叶临湘;王斌;郑华英;李燕;杨继红

来源:中国人兽共患病杂志 2004 年 20卷 2期

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作者:
唐少文;叶临湘;王斌;郑华英;李燕;杨继红
来源:
中国人兽共患病杂志 2004 年 20卷 2期
标签:
人B组轮状病毒 非结构蛋白NSP2 基因克隆 序列分析
目的了解人B组轮状病毒近20年来基因变异情况,为轮状病毒疫苗的研制提供依据.方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增人B组轮状病毒WH-1株NSP2基因489bp的片断,并将其克隆到载体pUCmT,转化感受态细胞One-shot Top10F',提取转化菌质粒经限制性内切酶PstI酶切分析,筛选出阳性菌提取质粒,对插入片段进行了测序和核苷酸序列分析.结果利用GeneBee与其他B组轮状病毒株ADRV(人)、CAL-1(人)及IDIR(鼠)的NSP2基因进行同源性比较,发现毒株WH-1与ADRV核苷酸序列的同源性达99.8