目的构建牙龈卟啉单胞菌胶原酶基因prtC原核表达系统并鉴定其表达产物的抗原性和免疫反应性,确定牙周损伤与其局部PrtC水平之间的关系.方法采用高保真PCR从牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277 和47A-1株扩增出全长prtC基因片段,T-A克隆后测序.采用pET32a质粒和大肠杆菌BL21DE3株构建prtC基因原核表达系统,并用不同浓度的IPTG诱导目的重组蛋白rPrtC的表达.采用Western blot检测rPrtC的抗原性和免疫反应性.建立ELISA,检测人慢性牙周炎龈下菌斑标本中的PrtC水平.结果牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277 和47A-1株prtC基因核苷酸序列完全相同.与报道的相应序列比较,克隆的prtC基因核苷酸和氨基酸序列相似性分别为98.46
作者：阮萍；罗耀东；严杰
来源：中国人兽共患病杂志 2005 年 21卷 5期
