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目的制备特异、敏感的卡氏肺孢子虫(Pc)DNA探针,用于检测卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)患者临床标本中的Pc DNA.方法 PCR扩增获得Pc的线粒体核糖体RNA大亚基基因,以其为模板,采用随机引物法制备半抗原地高辛标记的探针.检测探针的敏感性和特异性后,用斑点杂交法检测实验大鼠肺组织和PCP患者临床标本中的Pc DNA.结果敏感性检测显示该探针可检出2pg水平的Pc DNA,特异性检测显示该探针仅与Pc DNA杂交,而不与伯氏疟原虫、恶性疟原虫、弓形虫、人白细胞及正常大鼠肺组织DNA反应.斑点杂交检测PCP大鼠肺组织中的Pc DNA,检出率为73.7

作者:徐霞;张英杰;陈锡慰

来源:中国人兽共患病杂志 2005 年 21卷 6期

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作者:
徐霞;张英杰;陈锡慰
来源:
中国人兽共患病杂志 2005 年 21卷 6期
标签:
卡氏肺孢子虫 卡氏肺孢子虫肺炎 DNA探针 斑点杂交
目的制备特异、敏感的卡氏肺孢子虫(Pc)DNA探针,用于检测卡氏肺孢子虫肺炎(PCP)患者临床标本中的Pc DNA.方法 PCR扩增获得Pc的线粒体核糖体RNA大亚基基因,以其为模板,采用随机引物法制备半抗原地高辛标记的探针.检测探针的敏感性和特异性后,用斑点杂交法检测实验大鼠肺组织和PCP患者临床标本中的Pc DNA.结果敏感性检测显示该探针可检出2pg水平的Pc DNA,特异性检测显示该探针仅与Pc DNA杂交,而不与伯氏疟原虫、恶性疟原虫、弓形虫、人白细胞及正常大鼠肺组织DNA反应.斑点杂交检测PCP大鼠肺组织中的Pc DNA,检出率为73.7