目的刚地弓形虫醛缩酶是其速殖子入侵宿主细胞过程中的一个重要分子,本研究对该酶基因序列及其内含子进行实验和分析.方法提取刚地弓形虫RH株速殖子基因组DNA和总RNA,采用PCR技术分别从基因组DNA和cDNA中扩增编码果糖1,6-二磷酸醛缩酶的基因,并克隆到T载体上,经测序鉴定后对其基因组序列和cDNA序列进行比较分析.通过NCBI数据库资源对醛缩酶内含子的分布及大小进行比较分析.结果根据醛缩酶基因设计的引物从基因组DNA扩增得到的片段长度为1 315 bp,从cDNA扩增得到的片段为993 bp.比对结果显示来源于基因组DNA的序列在对应于编码序列起始密码子下游109*!bp后有一个322*!bp的内含子.通过在线工具收集得到NCBI及EMBL数据库中来源于不同物种的32种醛缩酶数据,分析显示推断氨基酸序列具有保守性.结论编码刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)RH株果糖1,6-二磷酸醛缩酶基因编码区内存在一个322*!bp的内含子.醛缩酶氨基酸序列保守性较高.内含子在不同进化等级之间插入位置数目及大小两方面均存在明显的增加趋势.
作者：余南；何蔼；李卓雅；郑斌；詹希美
来源：中国人兽共患病杂志 2005 年 21卷 7期
