目的了解从黑天鹅分离H5N1亚型流感病毒株血凝素基因特性.方法用RT-PCR扩增目的基因,用PGBM-TVecTor(美国Promeqa公司)4℃过夜连接重组质检转入dH5α细菌,筛选阳性菌落,酶切鉴定.送六合通公司自动测序,然后进行进化树分析,并推导出基因树序列.结果从黑天鹅分离出H5N1毒株血凝素的重链区与轻链区连接肽的序列为R-E-R-R-R-K-R,即含一串碱性氨基酸,共有8个潜在的糖基化位点,其中6个位于重链区的第9、10、23、165、193和296位点上;其余2个位于轻链区的第154和213位点上.其HA基因进化树与无论从家禽还是从人中分离的均有差异.结论从黑天鹅中分离的H5N1亚型流感病毒为对禽是高致病性的,他的HA基因不同于从人和家禽中分离出的H5N1毒株.
作者:程小雯;吕星;房师松;刘建军;周丽;何建凡
来源:中国人兽共患病学报 2006 年 22卷 3期